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1、 動物三箱社交自由探索實驗(three chamber free exploring test)
小鼠天性對新奇事物有好奇心，研究表明，與熟悉的環(huán)境相比，小鼠對不 熟悉的環(huán)境有更強探索yu望。本實驗是在一個(20+8+20) *20cm的位置偏好箱 中完成的，包含左側(cè)箱、右側(cè)箱和中間箱(自由運動時小鼠從中間箱放入，避 免人為控制的左右箱進入順序?qū)嶒灲Y(jié)果造成影響)。自由探索實驗(free exploring)以及后面將要提到的實時位置偏好實驗均是用這種三箱裝置完成， 每套三箱設備使用不同的花紋的壁紙以及不同紋路地板作為不同環(huán)境。所用到 的壁紙有四種圖案，A.黑白星形格B.斜黑白條紋C.黑白方格D.豎直黑白 條紋,本文所用到的地板有兩張，地板1.左側(cè)平板，右側(cè)淺斜條紋；地板2.左 側(cè)空心圓格，右側(cè)空心條紋，將環(huán)境與地板配對使用。
環(huán)境自由探索實驗旨在評價小鼠的探索行為，研究目標腦區(qū)及環(huán)路在探索 行為中所起的作用。自由探索實驗中，所用到環(huán)境為A.黑白星形格+B.斜黑白 條紋壁紙和地板1左側(cè)平板，右側(cè)淺斜條紋，每次實驗前均需測試小鼠對三箱 環(huán)境偏好的基礎值，即baseline測定。
2、主要材料和設備
| 材料和設備 | 廠商信息 |
行為測試箱 | |
| 攝像頭 | 上海欣軟 |
| 攝像頭支架 | |
| 采集卡 | 上海欣軟 |
| SuperMaze動物行為分析軟件 | 上海欣軟 |
| 473nm藍光激光器 | 杭州紐頓 |
3、三箱社交探索實驗基本步驟
本文采用的自由探索行為實驗(free exploring)包括連續(xù)三天的測試。
第YI天為基線baseline檢測，每只小鼠放入中央箱之后開始自由探索，每 只小鼠探索時間為20min,軟件將自動記錄小鼠運動軌跡、平均速度以及在各 箱所停留的時間進入次數(shù)等參數(shù)，將其記為baselineo
第二天為training階段，用中間隔板將小鼠限制于某一側(cè)環(huán)境，讓其在zhi定的20*20cm單側(cè)箱內(nèi)自由探索，并同時給予473nm LED光照，刺激參數(shù) BLA/NAC均為20Hz, 15ms,光纖末端光強10mw左右。(為避免激光損輸出 傷，刺激模式為3s-on-3s-off不斷循環(huán)，直到20min測試時間束。)
第三天為test階段，位置偏好箱兩側(cè)均正常開放，將小鼠置于中央箱，令 其自由探索20min,并利用軟件系統(tǒng)自動記錄小鼠運動軌跡、平均速度以及在 各箱所停留的時間、進入次數(shù)等參數(shù)，將其記為Test。
(環(huán)境探索實驗使用的三箱環(huán)境為A.黑白星形格+ B.斜黑白條紋壁紙和地 板1左側(cè)平板，右側(cè)淺斜條紋。由于第二天training階段在zhi定封閉環(huán)境中給 光刺激20min,在第三天test時，與非刺激環(huán)境相比，該光刺激環(huán)境對于小鼠 而言是熟悉的環(huán)境(familiar),因此由于對不熟悉環(huán)境的探索天性，小鼠在 test階段理論上將對非光照的不熟悉環(huán)境表現(xiàn)出更強的偏好性。)
4、注意事項
(I) .為避免激光損傷，藍色激光刺激模式為間歇給光。
(II) .每次實驗前，小鼠先放入彳丁為學室適應半小時以上。
(III) .每只小鼠實驗結(jié)束后，應用75%酒精*清潔實驗箱，避免小鼠行為結(jié)果 受到上一只小鼠的氣味影響。
